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【助力冠状病毒肺炎防控】TIANGEN冠状病毒自动化提取检测方案

发布日期:2020年01月28日   浏览次数26
2019年12月底,自湖北省武汉市开始多个省市陆续发生肺炎疫情。截至1月20日18时,境内累计报告新型肺炎病例224例,其中确诊病例217例(武汉市198例,北京市5例,广东省14例);疑似病例7例(四川省2例,云南省1例,上海市2例,广西壮族自治区1例,山东省1例)。病毒传染源尚不明确,疾病死亡率为3.2%。



2020年1月12日,世界卫生组织(WHO)发布公告,本次肺炎疫情由一种新型的冠状病毒(2019-nCov)导致。冠状病毒是一类在动物之间传播的病毒,核酸类型为单链RNA。同时,WHO也发布了由中国学者分享的nCov的核酸序列信息,为病毒的检出提供了分子检测依据,让快速地检测和鉴定病原体成为可能。

WHO建议对发生咳嗽、发热、呼吸道感染等急性呼吸系统疾病、且在14天内去过武汉或与其他患者暴露接触者进行全面检测,并于1月17日发布nCov的实验室检测的临时指导(Laboratory testing for 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) insuspected human casesInterim guidance, 17 January 2020)。指导指出采集的材料包括呼吸材料(鼻咽和口拭子、痰液、肺泡灌洗液等)和血清样本等,具体如下:

注*:要运输用于病毒检测的样品,请使用包含抗真菌和抗生素补充剂的病毒运输介质。对于细菌或真菌培养,运输干燥或使用少量无菌水运输。避免反复冷冻和解冻标本。运输过程中注意人员保护,避免暴露。

 

对于病毒检测,血清样本可用免疫学方法检测病毒,而更快速、更准确的检测建议使用RT-qPCR的方式检测nCov病毒核酸。由于病毒序列已知,只需选择合适的试剂、配套确定的引物,即可快速检测样本中病毒核酸的含量。


(Diagnostic detection of Wuhan coronavirus 2019 by real-time RTPCR, Protocoland preliminary evaluation as of Jan 13, 2020)

天根生化科技(北京)有限公司作为中国核酸提取及检测领域的领军者,多次为国家病毒性流行病的诊断及预防提供帮助,在手足口病毒、甲型H1N1流感病毒的检测中提供超过1000万人份的病毒检测产品。2019年,TIANGEN提供的检测试剂应用在三千万头份的非洲猪瘟样本的病毒核酸提取检测中,为中国非洲猪瘟的诊断与预防做出了突出贡献。

 

TIANGEN不但提供病毒的快速准确的提取和检测试剂,还同时提供便捷高效的组织研磨和自动化核酸提取仪,组成了病毒的提取检测的全套yabobet体育


自动化核酸提取方案


TIANGEN全自动核酸提取仪是使用磁珠法进行核酸提取的自动化平台,该平台的应用不仅大大降低了检验检疫部门的工作量,更减少了手工提取的操作失误,确保了提取核酸质量的一致性和稳定性。


TIANGEN全自动核酸提取仪通量丰富(包括16、24、32、48、96通道),配套试剂可用于多种样本类型的核酸提取,更能够依据不同提取需求提供定制化试剂开发和仪器整合服务。


1.TGrinder H24 组织研磨均质仪




● 广泛适用于各类组织及粪便样本的研磨均质

● 研磨均质力度为传统仪器2-5倍

● 研磨均质效果均一,避免交叉污染

● 自动保护装置,保护实验人员安全


2.TGuide S32 全自动核酸提取纯化仪




● 样本处理量:1-32个样本

● 样本处理体积:20-1000 µl

● 样本类型:血液、细胞、组织、粪便、病毒等多种样本

● 样本处理时间:最快可8 min获得病毒核酸

● 操控模式:Windows Pad 和机屏按键双操控模式

● 平台开发性:开放平台,可自由搭配试剂


3.磁珠法病毒 DNA/RNA提取试剂盒(DP604)




● 适用广泛:能够从血清、血浆、拭子样本、组织处理液、各种病毒保存液中分离纯化高质量病毒DNA/RNA。


● 简单高效:本产品与TGuide S32自动核酸提取仪完美契合,提取病毒DNA/RNA得率高、纯度高、质量稳定可靠。


● 下游应用:纯化后的核酸适用于病毒PCR及荧光定量PCR的下游实验。


手动核酸提取方案


TIANGEN作为核酸提取及检测领域的领军者,拥有国内应用样本类型最广泛的核酸提取系列产品,能够应对冠状病毒检测的各类样本:血液、血清/血浆、组织、拭子、病毒等。


病毒基因组 DNA/RNA 提取试剂盒




● 高效率:快速纯化得到高质量病毒 DNA 和 RNA,重复性高

 高纯度:完全去除污染物和抑制剂,方便下游应用

● 高安全性:无有机试剂抽提或乙醇沉淀


RNA病毒检测方案


1.Teasy自动化提取系统




● 精准度高:制冷模块可以保持试剂样本温度在7℃以下超过60 min。每一个APM都按照国际标准进行校正,相比手工移液有着更高的精密度。
● 使用简单:体积小,重量轻,模块更换无需工具,内置的PCR/qPCR配制程序,简化PCR配液人工操作
● 应用广泛:可应用于96/384孔板分液/移液,PCR,qPCR,基因检测等高通量实验。

2.探针法一步反转录-荧光定量试剂盒(FP314)



TIANGEN研发的FastKing One Step RT-qPCR Kit (Probe)(FP314)特别为检测样本中的微量基因设计,是基于探针的一步法反转录荧光定量检测试剂盒。试剂盒中的King RTase是分子改造后的新型逆转录酶,具有更强的RNA亲和性和热稳定性,大大提高了反转录效率和对复杂二级结构RNA模板的延伸能力;PCR过程中采用了新型热启动 Taq DNA聚合酶,使PCR反应具更高的扩增效率和特异性。此外,试剂盒对组分进行了最大限度的简化,将taq和MLV酶混合为Enzyme mix,另将离子buffer、dNTPs、PCR稳定剂和增强剂预混为Master Mix,实验中无需多组分混合,操作简单便捷。

● 高效:性能优良的逆转录酶和DNA聚合酶保证了极高的反应效率;

● 抗逆:通读GC含量高,二级结构复杂的RNA模板;

● 普适:对不同物种来源及杂质较多的RNA模板的适用性高;

● 灵敏:低至1 ng 的模板也能被准确识别,特别适合低丰度模板。


RNA病毒检测实例


使用TGuide S32磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒(DP604)提取禽流感H5病毒核酸,采用禽流感H5病毒检测引物及探针,使用TIANGEN FastKing One StepRT-qPCR Kit (Probe)(FP314) 进行RT-qPCR 检测, RT-qPCR 检测仪器为ABi7500Fast。综合上述200 μl禽流感H5病毒抗原(10-2、10-3、10-4、10-5、10-6和10-7稀释倍数) 样本病毒核酸提取实验结果可以看出,病毒核酸提取结果得率良好,能够满足反转录、PCR、RT-PCR、荧光定量PCR 等后续实验需求;定量检测灵敏度高、重复性好、梯度稀释线性度好,对于不同浓度的病毒核酸样本都能精确定量检测。


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